SDS-PAGE蛋白電泳套裝
本公司提供的蛋白電泳套裝包含凝膠制備,蛋白上樣緩沖液及蛋白電泳上樣緩沖液。本公司生產(chǎn)的SDS-PAGE蛋白電泳套裝是按照經(jīng)典方法配制而成。本套裝根據(jù)電泳體系的大小,可進(jìn)行約50次左右。
SDS-PAGE蛋白電泳套裝
P0400 SDS-PAGE蛋白電泳套裝 NobleRyder 50T 460.00
本公司供應(yīng)化學(xué)試劑的SDS-PAGE蛋白電泳套裝,*,歡迎洽談。
名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
5×蛋白上樣緩沖液(含DTT) | 1ml | -20度 |
Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液 | 一包(10L) | RT |
30%丙烯酰胺(29:1) | 100mlX2 | 2-8度 |
1.5mol/LTris(pH8.8) | 100mlX2 | RT |
1.0mol/LTris(pH6.8) | 60ml | RT |
過硫酸銨干粉 | 2g | RT |
10%SDS | 10ml | RT |
TEMED | 1.5ml | RT |
說明書 | 一份 | 一份 |
產(chǎn)品簡介
本公司提供的蛋白電泳套裝包含凝膠制備,蛋白上樣緩沖液及蛋白電泳上樣緩沖液。
本公司生產(chǎn)的SDS-PAGE蛋白電泳套裝是按照經(jīng)典方法配制而成。本套裝根據(jù)電泳體系的大小,可進(jìn)行約50次左右。
使用說明:
一,前期工作:蛋白提取及定量。
二,蛋白上樣液的制備:蛋白上樣緩沖液解凍,輕輕混勻,按4體積蛋白樣品加入一體積的5×蛋白上樣緩沖液,混勻,沸水中水浴5分鐘。
三,電泳液的配制:將一包電泳液干粉全部倒入1L-2L的燒柄中,加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液,用前再稀釋5倍或者先配成1L成為10×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液,用前再稀釋10倍。
四,取10-15支1.5ml離心管,將過硫酸銨干粉分裝成100mg/支,標(biāo)記好備用。
五,凝膠制備:
1,取一支稱好的100mg過硫酸銨干粉,加入1ml蒸餾水,混勻,此配好的10%過硫酸銨溶液2-8度可保存一周,一周后請(qǐng)用新的。洗干凈電泳玻璃板,夾好。
2,根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量大小,選取凝膠濃度,按下表配制。先配分離膠,再配濃縮膠。
| 分離膠15% | 分離膠12% | 分離膠10% | 分離膠8% | 濃縮膠(5%) |
總體積 | 10ml | 10ml | 10ml | 10ml | 5ml |
30%丙烯酰胺(29:1) | 5ml | 4ml | 3.3ml | 2.7ml | 0.83ml |
1M Tris-HCL (PH6.8) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.625ml |
1.5M Tris-HCL(PH8.8) | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 0 |
10%SDS | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 50ul |
ddH2O | 2.3ml | 3.3ml | 4.0ml | 4.6ml | 3.42ml |
10%過硫酸銨 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 75ul |
TEMED | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 7.5ul |
注意:
1,TEMED和10%過硫酸銨zui后加,在加入前需混勻前面所加試劑。10%過硫酸銨在4℃有效期為一周,TEMED易揮發(fā),使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。在常溫下膠30分鐘內(nèi)可以凝固,如溫度過低,可放37℃溫箱凝固。灌完分離膠后,輕輕的加1ml ddH2O封上層,膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前,先傾去水層,再用吸紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后,放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔),輕輕的撥出梳子,可防加樣孔變形。
2,配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同,可自行調(diào)整,主要是調(diào)整30%丙烯酰胺的量(需要濃度×總體積/30%),zui后用水補(bǔ)足總體積。
六,上樣,電泳,一般是濃縮膠80V,分離膠120V恒壓,等溴酚蘭電泳到合適的位置,結(jié)束電泳,染色或者進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 品牌 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
P0330 | 20×TBS | NobleRyder | 500ml | 100.00 |
P0400 | SDS-PAGE蛋白電泳套裝 | NobleRyder | 50T | 460.00 |
P0340 | TBST(TBS-T) | NobleRyder | 500ml | 60.00 |
P0370 | 膜封閉液 | NobleRyder | 100ml | 50.00 |
P0380 | 膜再生液 | NobleRyder | 100ml/500ml | 60.00/180.00 |